timsTOF MALDI PharmaPulse®

Những hiểu biết mới về tương tác phân tử của HTS không nhãn tận dụng công nghệ timsTOF cải tiến.

Danh mục: Thẻ: , Brand:

HTS sâu, không bị lệch bằng phép đo khối phổ không nhãn

TimsTOF MPP đại diện cho thành viên chủ lực của dòng sản phẩm Bruker PharmaPulse ® . Nó có tốc độ cực cao và độ bền đã được chứng minh của MALDI và, lần đầu tiên trong HTS, tận dụng công nghệ Quang phổ di động ion bẫy (TIMS) cải tiến của Bruker. TIMS cho phép phân tách các đồng đẳng và thậm chí cả các chất đồng phân ở pha khí nhanh chóng bằng cách khai thác mặt cắt va chạm phân tử. Điều này, kết hợp với độ phân giải khối lượng 50.000 thông thường trong phát hiện QTOF-MS cho phép mức độ đặc hiệu của xét nghiệm mang tính cách mạng ở tốc độ HTS.

timsTOF MPP sử dụng nguồn ion MALDI / ESI kép với laser 10 kHz smartbeam™ 3D hàng đầu trong ngành để cho phép tốc độ và thông lượng tương thích với uHTS, đồng thời có sẵn tùy chọn MALDI-2 duy nhất cho không gian hóa học mở rộng.

Là một phần của giải pháp, phần mềm MALDI PharmaPulse ® 2023 mới hỗ trợ nhiều ứng dụng HTS để khám phá thuốc. Giao diện tự động hóa của nó cho phép tích hợp timsTOF MPP trong môi trường thông lượng cao và hoạt động cùng với phần mềm lập lịch từ các nhà cung cấp khác nhau. Hơn nữa, MPP 2023 cho phép truyền dữ liệu và kết quả liền mạch sang phần mềm phân tích xuôi dòng, ví dụ: sang Genedata Screener ® .

timsTOF MALDI PharmaPulse
Tốc độ & Mạnh mẽ
timsTOF MALDI PharmaPulse cung cấp khả năng uHTS thực sự với tốc độ đọc nhanh lên đến 3 giếng/giây và độ bền của MALDI đã được chứng minh.
Bật TIMS
timsTOF MPP bổ sung một khía cạnh mới cho HTS bằng cách sử dụng, lần đầu tiên, Phép đo phổ di động ion bị bẫy để phân tách cực nhanh và nhận biết CCS.
Độ đặc hiệu
Kết quả HTS vượt trội được cung cấp bằng cách kết hợp quá trình phân tách TIMS của các đồng phân và đồng phân với khả năng đọc nhạy cảm bằng QTOF-MS khối lượng chính xác có độ phân giải cao.
Tính linh hoạt
Hiệu suất mạnh mẽ trong một loạt các ứng dụng thông lượng cao, từ xét nghiệm định lượng đến sàng lọc tổng hợp gần thời gian thực trong hóa học HTE.

Chất lượng dữ liệu vượt trội được phân phối ở tốc độ HTS vượt trội

timsTOF MPP cung cấp dữ liệu QTOF-MS khối lượng chính xác có độ phân giải cao ở tốc độ phân tích cao trong suốt các chiến dịch mua lại lớn – một yêu cầu quan trọng để thành công trong uHTS. Việc đọc tấm mẫu có định dạng 1536 ở chế độ MS hoặc MS/MS có độ phân giải cao thường mất chưa đến 10 phút (tốc độ đọc lên tới 3 giếng/giây). Chất lượng dữ liệu vượt trội được duy trì trong suốt các phép đo quy mô lớn đảm bảo trích xuất tính năng định lượng chính xác cho nhiều loại phân tử mục tiêu khác nhau, từ các hợp chất nhỏ giống như thuốc cho đến các peptide có kích thước lớn chuyển thành tỷ lệ phát hiện sai được giảm thiểu (FDR).

Độ chính xác khối lượng được theo dõi đối với hai ion peptit trong khoảng thời gian hơn 5 giờ:

timsTOF MPP data

Đường cong chuẩn độ thu được cho perphenazine (MW 403 Da) trên 3 bậc của dải nồng độ (0,001 – 1 µM):

Đường cong chuẩn độ thu được cho ubiquitin (MW 8558 Da) trên 2 bậc của khoảng nồng độ cường độ (0,01 – 1 µM):

Lợi ích của TIMS: Tách nhanh các đồng phân và đồng phân

TIMS có khả năng tách các đồng phân và thậm chí các chất đồng phân trong khoảng thời gian nhanh hơn đáng kể so với SPE (thường ≤ 1 giây trên mỗi chu kỳ phân tách) cho phép định lượng không bị nhiễu các hợp chất mục tiêu không thể phân biệt chỉ bằng phép đo khối phổ.

Ví dụ:  Phân tích định lượng MALDI-TIMS-MS của glucose (C6H12O6 ) với sự có mặt của fructose đồng phân (C6H12O 6 )

Các chế độ hoạt động timsTOF nâng cao cho kết quả định lượng nâng cao

Trong HTS, việc định lượng các hợp chất mục tiêu có thể bị ảnh hưởng bởi các nền mẫu phức tạp thường có trong các xét nghiệm sinh hóa hoặc xét nghiệm tế bào. timsTOF MPP cung cấp các khả năng độc đáo để vượt qua các nhiễu nền như vậy: Phép đo phổ di động ion bị bẫy (TIMS) tham gia để phân tách nhanh trong pha khí và khai thác tính đặc hiệu gia tăng được cung cấp bởi MS và MS/MS độ phân giải cao, các chế độ vận hành timsTOF MPP tiên tiến cho phép giảm thiểu hiệu quả mức nhiễu nền dẫn đến tăng cường định lượng ở tốc độ HTS.

Ví dụ: Phân tích định lượng phân tử giống thuốc (MW 543 Da)
Định lượng ở chế độ MALDI-MS bị gián đoạn do chồng chéo quang phổ với nền xét nghiệm. Thực hiện phép phân tích tương tự ở chế độ MALDI-TIMS-MS/MS cho phép định lượng phân tử mục tiêu mà không bị nhiễu.

Sample courtesy: Dr. Frank H. Büttner & Team, Drug Discovery Sciences, Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG, Biberach, Germany

MALDI PharmaPulse 2023: Phần mềm chuyên dụng hỗ trợ quy trình công việc HTS

Là một phần của giải pháp timsTOF MPP, phần mềm MALDI PharmaPulse 2023 hỗ trợ nhiều ứng dụng HTS trong khám phá thuốc sớm. Phần mềm này cung cấp một giao diện dễ sử dụng để thiết lập và thực hiện liền mạch các chiến dịch sàng lọc bằng cách sử dụng các chế độ hoạt động khác nhau của timsTOF MPP thu hút TIMS và MS/MS. Giao diện tự động hóa được cung cấp với MPP 2023 cho phép tích hợp hệ thống trong môi trường HTS và hoạt động cùng với phần mềm lập lịch trình tự động hóa từ nhiều nhà cung cấp khác nhau. Hơn nữa, MPP 2023 cho phép chuyển trực tiếp dữ liệu và kết quả sang phần mềm phân tích xuôi dòng của bên thứ ba, chẳng hạn như Genedata Screener ® .

Một giải pháp tích hợp thế hệ tiếp theo cho HTS & uHTS không nhãn dựa trên MS

Cốt lõi của giải pháp là khối phổ kế timsTOF của Bruker được trang bị:

  • Nguồn ion MALDI / ESI kép
  • Bộ tải tự động để trao đổi tấm MALDI bằng robot
  • MALDI-2 (tùy chọn)

Bộ điều hợp tấm trọng lượng nhẹ đảm bảo xử lý an toàn các tấm MALDI bằng rô-bốt phòng thí nghiệm trong quá trình chuẩn bị mẫu hoàn toàn tự động và các chiến dịch thu thập dữ liệu tiếp theo.

Các tấm mẫu MALDI dùng một lần tiết kiệm chi phí cho phép chuẩn bị MALDI tự động bằng bộ xử lý chất lỏng hiệu suất cao ở bất kỳ định dạng nào từ 96 đến 1536 và hơn thế nữa.

 

Sàng lọc hoạt động của enzyme được kích hoạt trong thời gian ngắn nhất để có kết quả

Giám sát hoạt động của enzyme không cần dán nhãn được thực hiện trên timsTOF MALDI PharmaPulse ® ở tốc độ HTS và mức hiệu suất cao nhất.

Trong một nghiên cứu chứng minh khái niệm, các biến thể enzym được xử lý bằng công nghệ sinh học khác nhau đã được thử nghiệm về hoạt động của chúng bằng cách định lượng glucoza là sản phẩm cuối cùng của quá trình chuyển đổi enzym sử dụng 13 C 6 glucoza làm chất chuẩn nội. Dữ liệu khối lượng chính xác có độ phân giải cao do timsTOF MPP cung cấp cho phép trích xuất tính năng mục tiêu mạnh mẽ và đáng tin cậy dẫn đến các giá trị RSD vượt trội trong khoảng từ 0,1 đến 3,7 %.

Sample courtesy: Prof. Peter Westh, Department of Biotechnology and Biomedicine, Danmark´s Tekniske Universitet, Lyngby, Denmark

Sàng lọc tổng hợp hỗ trợ CCS trong hóa học HTE hỗ trợ gần thời gian thực

Để tìm kiếm các phân tử thuốc mới, thử nghiệm thông lượng cao (HTE) tạo ra các thư viện rộng lớn gồm các hợp chất mới được thiết kế thông qua hóa học thông lượng cao đa biến thể. Một nút cổ chai quan trọng trong quá trình này là phân tích và xác nhận nhanh chóng các sản phẩm phản ứng hóa học.

timsTOF MPP có khả năng bắt kịp với hóa học HTE và cho phép xác minh các sản phẩm tổng hợp gần như theo thời gian thực ở mức độ tin cậy cao bằng cách đo nhiều tính chất vật lý, tức là khối lượng phân tử chính xác, mẫu đồng vị, mặt cắt va chạm (CCS) và, trên -nhu cầu, dữ liệu phân mảnh CID-MS/MS, giảm thời gian phản hồi HTE và chi phí hóa chất.

MALDI-2: Tiếp cận không gian hóa học mở rộng

MALDI-2, một công nghệ mới mang tính đột phá dựa trên quá trình ion hóa sau bằng laser, nâng cao khả năng phát hiện của một số loại hợp chất trước đây nằm ngoài phạm vi của MALDI thông thường, cung cấp khả năng tiếp cận phân tích vào không gian hóa học mở rộng.

Sản phẩm tương tự

Khối phổ timsTOF

timsTOF fleX MALDI-2

Khối phổ MALDI-TOF

rapifleX ® MALDI PharmaPulse ®

Khối phổ timsTOF

timsTOF Pro 2

Khối phổ MALDI-TOF

microflex ® LRF

Khối phổ MALDI-TOF

MALDI Consumables

Khối phổ timsTOF

timsTOF fleX

Khối phổ MALDI-TOF

rapifleX® MALDI Tissuetyper®

Khối phổ MALDI-TOF

autoflex ® max