Glacios 2 Cryo – Kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM)

Một giải pháp hoàn chỉnh để xác định cấu trúc có độ phân giải cao

Kính hiển vi điện tử truyền qua nhiệt độ lạnh Thermo Scientific Glacios 2 (cryo-TEM) 200 kV cho phép dễ dàng thu thập dữ liệu gần nguyên tử từ nhiều mục tiêu sinh học. So với thế hệ trước, Glacios 2 Cryo-TEM mang lại thông lượng cao hơn và giúp cryo-EM dễ tiếp cận hơn. Nó có Máy dò điện tử trực tiếp Thermo Scientific Falcon 4i tích hợp, Phần mềm Thermo Scientific EPU và vỏ bọc hoàn chỉnh mới, kết hợp để nâng cao chất lượng hình ảnh, tự động thu thập dữ liệu và đơn giản hóa công việc của bạn. Glacios 2 Cryo-TEM phù hợp lý tưởng cho các ứng dụng phân tích hạt đơn, chụp cắt lớp điện tử lạnh (cryo-ET) và nhiễu xạ vi điện tử (MicroED).

Cryo-TEM được thiết kế cho độ phân giải và hiệu suất cao

Thermo Scientific Glacios 2 Cryo-TEM thể hiện nhiều tiến bộ giúp thực hiện phân tích chất lượng cao trên các thiết bị 200 kV. Glacios 2 Cryo-TEM cung cấp độ phân giải gần như nguyên tử. Với phần cứng được cải tiến và vỏ bọc mới giúp giảm thiểu ảnh hưởng của môi trường, Glacios 2 Cryo-TEM hiện có giới hạn thông tin là 2,1 Å. Tương tự, tổn thất truyền tải do hệ thống lạnh đã giảm xuống còn 2% trong 24 giờ, giúp thu thập được nhiều hình ảnh có độ phân giải cao hơn mà tốn ít công sức hơn.

Điểm nổi bật của Glacios 2 Cryo-TEM

Sự kết hợp giữa Bộ lọc năng lượng Thermo Scientific Selectris X với Đầu dò điện tử trực tiếp Thermo Scientific Falcon 4i, vỏ bọc được thiết kế mới và Phần mềm EPU thông minh Thermo Scientific phối hợp với nhau để hướng dẫn kính hiển vi và người dùng thu được kết quả tốt nhất có thể từ các mẫu của họ. Glacios 2 Cryo-TEM kết hợp với FEG lạnh năng lượng thấp Thermo Scientific (E-CFEG), Bộ lọc năng lượng Thermo Scientific Selectris X, Máy dò điện tử trực tiếp Thermo Scientific Falcon 4i, vỏ bọc được thiết kế mới và Thermo Scientific Smart Phần mềm EPU phối hợp với nhau để hướng dẫn kính hiển vi và người dùng đạt được kết quả tốt nhất có thể từ các mẫu của họ với độ phân giải, tốc độ và tính dễ sử dụng ở 200 keV.

Thermo Scientific E-CFEG là súng phát xạ trường lạnh với dải năng lượng hẹp mang lại hình ảnh có độ tương phản và độ phân giải cao hơn. Tiện ích bổ sung này giúp giải quyết hiệu quả các cấu trúc ở độ phân giải 2,5 Å trở xuống.

Nguồn
  • Súng phát xạ trường độ sáng cao (X-FEG)
  • FEG lạnh năng lượng thấp (E-CFEG)
Điện áp tăng tốc
  • Điện áp tăng tốc linh hoạt từ 80–200 kV
Trình nạp tự động lạnh
  • Cryo-Autoloader để nạp băng cassette tự động và không bị nhiễm bẩn chứa tới 12 lưới tự động
Vật kính
  • Tự động ngưng tụ, vật kính và khẩu độ SA
  • Vật kính có công suất không đổi đối xứng (giảm thiểu quang sai hình ảnh và độ trễ của ống kính trong quá trình chuyển đổi chế độ)
  • Thấu kính vật kính C-TWIN có công suất không đổi đối xứng với mảnh cực có khe hở rộng (11 mm)
Bàn soi
  • Bàn soi mẫu mẫu 4 trục được vi tính hóa với độ nghiêng alpha ±70°
  • Bàn soi lạnh với giá đỡ trục đơn
Hình ảnh
  • Hình ảnh không xoay khi thay đổi độ phóng đại
Điểm nổi bật của yêu cầu cài đặt
  • Nhiệt độ môi trường: 18°C–23°C
  • Chiều cao cửa: 2,32 m (tùy chọn giảm xuống 2,00 m)
  • Chiều rộng cửa: 0,99 m
  • Chiều cao trần: 2,80 m
AFIS (dịch chuyển hình ảnh không quang sai)
  • Nâng cao thông lượng với thời gian dịch chuyển ngắn hơn và không bị coma trên lưới
FFI (hình ảnh không viền)
  • Hình ảnh không có vệt (FFI) để thu được nhiều hình ảnh trên lưới
Phần mềm EPU thông minh
  • Phần mềm EPU 3 để sàng lọc mẫu và thu thập dữ liệu tự động (bao gồm giao diện lập trình ứng dụng mở)
  • Chức năng Multigrid EPU (tùy chọn)
  • Phần mềm giám sát chất lượng EPU (tùy chọn)
  • CryoSPARC Live được nhúng (tùy chọn)
Các thành phần bổ sung
  • Bộ điều khiển chính với hai màn hình 24” được đặt cách cột trong vòng 10 m
Máy dò (tùy chọn)
  • Máy dò điện tử trực tiếp Falcon 4i
  • Camera nhiệt khoa học Ceta-D
  • Camera nhiệt khoa học Ceta-M
  • Máy dò HAADF STEM*
  • Đầu dò BF/DF trên trục*
  • *STEM không tương thích với FFI
Bộ lọc năng lượng (tùy chọn)
  • Bộ lọc hình ảnh Selectris và Selectris X

Kết quả TEM độ phân giải cao

Tối ưu hóa phần cứng đã được tập trung vào việc cải thiện độ đặc hiệu và độ nhạy trong phát hiện điện tử. Ví dụ: Máy dò điện tử trực tiếp Falcon 4i mang lại hiệu suất lượng tử thám tử (DQE) cao trên toàn dải quang phổ, thu giữ các protein nhỏ, linh hoạt cũng như các cấu trúc lớn hơn bằng cách sử dụng ít hình ảnh hơn. Khi kết hợp với Bộ lọc năng lượng Selectris hoặc Selectris X, tín hiệu bị giới hạn ở mức tổn thất bằng 0, các electron phân tán đàn hồi, tạo ra dữ liệu TEM có độ tương phản cao cho thông lượng cao hơn và cấu trúc có độ phân giải cao hơn. E-CFEG tùy chọn, tích hợp có mức lan truyền năng lượng thấp hơn và độ kết hợp tốt hơn so với Schottky FEG truyền thống, cho phép độ tương phản cao hơn ở độ phân giải cao (<2,0 Å) và đạt được độ phân giải cao hơn trong thời gian ngắn hơn.

Thu thập hình ảnh cryo-TEM thông lượng cao

Máy dò điện tử trực tiếp Falcon 4i tích hợp cung cấp chất lượng hình ảnh tốt hơn so với các thiết bị thế hệ trước trong thời gian ngắn hơn. Để nâng cao hơn nữa năng suất và chất lượng hình ảnh, Glacios 2 Cryo-TEM cung cấp hình ảnh không có viền (FFI) giúp loại bỏ viền ở rìa chùm tia, giai đoạn ổn định hơn và thu thập dữ liệu tự động nhanh hơn. Cùng với nhau, những cải tiến này cho phép bạn thu thập nhiều hình ảnh hơn trên mỗi lỗ giấy bạc và tăng tốc độ phân tích hạt đơn lẻ và cryo-ET. Việc thêm Bộ lọc hình ảnh Selectris X cho phép bạn sử dụng độ rộng khe hẹp rất ổn định (<10 eV) để tăng thêm độ tương phản cho cryo-EM và cryo-ET hạt đơn, cải thiện độ phân giải và thu được kết quả nhanh hơn với ít dữ liệu hơn để tối đa hóa độ phân giải .

Phần mềm cryo-EM tự động tối đa hóa tính dễ sử dụng và hiệu quả

Phần mềm EPU thông minh cho phép thiết lập và xử lý nhanh hơn và dễ dàng hơn, mang lại lợi ích cho cả người sử dụng kính hiển vi chuyên nghiệp và không chuyên. Một số bước thiết lập quan trọng đã được tự động hóa, chẳng hạn như căn chỉnh cột và sửa chữa trạng thái hệ thống khi có thể. Ngoài ra, phần mềm và các tiện ích bổ sung tùy chọn khác nhau có thể giúp người dùng tận dụng tối đa thời gian sử dụng kính hiển vi và mang lại kết quả tốt nhất.

Sàng lọc mẫu Cryo-EM và kết nối quy trình làm việc

Sàng lọc mẫu là một thành phần thiết yếu của quy trình làm việc cryo-EM thành công, cho phép xác minh chất lượng mẫu về cả mặt sinh hóa và thủy tinh hóa. Glacios 2 Cryo-TEM phù hợp hoàn toàn với quy trình phân tích hạt đơn và quy trình làm việc cryo-ET với khả năng chuyển mẫu thuận tiện và không bị nhiễm bẩn trong suốt quy trình làm việc.

Tối ưu kích thước

Phần cứng của Glacios 2 Cryo-TEM được thiết kế đặc biệt với kích thước nhỏ hơn và đường dẫn truy cập dễ dàng hơn so với các kính hiển vi 200kV khác có hệ thống nạp mẫu tự động.

Phân tích hạt đơn với độ phân giải cao

Với khả năng phân giải cao, Glacios 2 Cryo-TEM lý tưởng cho phân tích hạt đơn, cho phép xác định cấu trúc gần nguyên tử của các protein phức tạp mà không cần kết tinh. Các mẫu có thể được nghiên cứu trực tiếp trong dung dịch. Có thể thu thập dữ liệu chất lượng cao nhờ cải tiến phần cứng và tích hợp Phần mềm EPU thông minh Thermo Scientific cải tiến.

Cryo-EM hiệu suất cao để khám phá thuốc

Phương pháp đông lạnh mẫu đang nhanh chóng thu hút sự quan tâm đến việc phân tích thuốc dựa trên cấu trúc, vì nó có thể hiển thị chính xác và nhanh chóng với độ phân giải cao về sự tương tác giữa thuốc và thụ thể của vô số mẫu. Glacios 2 Cryo-TEM có thể hoạt động như một thiết bị độc lập để thu thập dữ liệu có độ phân giải cao, chẳng hạn như CAK ở mức 2,3 Å, nhưng cũng đóng vai trò là hệ thống sàng lọc mạnh mẽ giúp tăng cường phân tích 300 kV tiếp theo. Glacios 2 Cryo-TEM được sử dụng để xác định hơn hai chục cấu trúc 3,5-4,5 Å kinase với tốc độ ~1 cấu trúc mỗi giờ. Cách tiếp cận này cải thiện đáng kể thông lượng và năng suất, tối ưu hóa thời gian dành cho Thermo Scientific Krios Cryo TEM có độ phân giải cao hơn và đảm bảo rằng dữ liệu chất lượng cao nhất chỉ được thu thập cho những mẫu lý tưởng nhất. Phương pháp này tạo điều kiện thuận lợi cho việc áp dụng cryo-EM vào thiết kế thuốc dựa trên cấu trúc lặp đi lặp lại, điều này ngày càng trở nên cần thiết để giải quyết các thách thức về sức khỏe toàn cầu.

Chụp cắt lớp

Glacios 2 Cryo-TEM cung cấp khả năng chụp cắt lớp điện tử cryo (cryo-ET) vượt trội, cung cấp hình ảnh quy mô nanomet về bên trong tế bào ở dạng 3D và hiển thị các phức hợp protein trong môi trường sinh lý của chúng. Sử dụng Glacios 2 Cryo-TEM, dữ liệu chụp cắt lớp có thể được lấy từ toàn bộ tế bào vi khuẩn hoặc các phiến mỏng được chuẩn bị bằng các thiết bị tia ion hội tụ Thermo Scientific Aquilos, Arctis hoặc Hydra Bio Cryo (Cryo-FIB).

MicroED

Việc xác định cấu trúc của các phân tử nhỏ và protein có thể gặp khó khăn khi sử dụng các phương pháp tiêu chuẩn như tinh thể học tia X. Glacios 2 Cryo-TEM cho phép chụp ảnh nhanh, độ phân giải cao bằng cách sử dụng nhiễu xạ điện tử vi tinh thể (microED), trong đó các chi tiết nguyên tử có thể được chiết xuất từ ​​​​các tinh thể nano riêng lẻ (kích thước <200 nm), ngay cả trong hỗn hợp không đồng nhất. Glacios 2 Cryo-TEM có thể được ghép nối với Camera Thermo Scientific CETA-D và Gói MicroED Thermo Scientific để có giải pháp hoàn chỉnh cho MicroED.