Thực hành mô học – Kinh nghiệm để tránh lỗi sai sót, tăng tính hiệu quả

Thực hành mô học

Việc thực hành mô học đòi hỏi sự cẩn thận, kỹ năng và quy trình hợp lý. Hướng dẫn dưới đây từ hãng Leica Biosystems sẽ cung cấp những kinh nghiệm thực tế về kỹ thuật thực hành tốt nhất và cách đơn giản tránh các lỗi phổ biễn.

Các bước thực hành mô học hiệu quả

Kiểm tra trạng thái cố định

 Các mẫu vật được xử lý nhanh chóng (đặc biệt là các mẫu vật lớn có thể không được cố định hoàn toàn).

 Không xem xét đến việc tối ưu hóa cố định các mẫu vật có vấn đề.

Step_12_Specimen_pots_various_sizes
Mẫu vật trong các thùng chứa lớn nên được kiểm tra càng sớm càng tốt để đảm bảo chúng sẽ được cố định hoàn toàn

Chuẩn bị lát cắt mỏng

 Luôn chuẩn bị cát lát mỏng, đều từ các mẫu vật lớn (độ dày tối đa 3–4 mm). Điều này đặc biệt quan trọng với các mô dày đặc.

 Lát cắt đôi khi dày 6 mm (hoặc hơn) và không đều.

Bước_13_Thử_trimmed_specimen
Các lát cắt khối u đồng nhất, mỏng (2–3mm) và sẵn sàng để xử lý.

Tránh làm hỏng mẫu vật

 Cẩn thận để tránh làm hỏng các mẫu mỏng, đặc biệt là những mẫu chưa được cố định hoàn toàn (xử lý cẩn thận, không làm nát, sử dụng lưỡi dao sắc).

 Các mẫu vật bị kẹp rất mạnh và không xem xét về trạng thái cố định của chúng. Đôi khi dao cắt bị cùn được sử dụng trong giải phẫu

Avoid Cross-contamination
Phần phổi nhuộm H&E cho thấy mô bị kẹp rất mạnh. Mô tươi hoặc mô được cố định một phần dễ bị tổn thương nhất, nhưng ngay cả mô được cố định tốt cũng có thể bị hỏng

Tránh lây nhiễm chéo

 Mỗi mẫu vật được xử lý trên một bề mặt được làm sạch để tránh khả năng lây nhiễm từ mẫu vật này sang mẫu vật khác.

 Đôi khi bề mặt xử lý mẫu không được làm sạch đúng cách giữa các mẫu. Điều này đáng lo ngại khi các loại mẫu vật giống nhau được cắt lần lượt và có thể lây nhiễm một mẫu bệnh phẩm ác tính sang một mẫu bệnh phẩm lành tính.

Step_15_Artefact_spec_to_spec_cont_B_1317_cropped
Phần phổi nhuộm H&E có chứa một mảnh mô lạ (gan) va chạm vào bề mặt khi cắt.

Cẩn thận với miếng lót bệnh phẩm sinh thiết

 Các mẫu vật mới hoặc chưa được cố định hoàn toàn không được đặt giữa các miếng lót sinh thiết xốp, đặc biệt là các mẫu vật sinh thiết kim lõi

 Đôi khi các mẫu vật nhỏ, tươi hoặc cố định không hoàn toàn được đặt giữa các miếng sinh thiết, đưa vào cassettes và sau đó cố định.

Bước_16_Artefact_biopsy_pad_LP
Khoảng trống có thể nhìn thấy trong phần cắt này gây ra bởi cấu trúc tế bào của các miếng lót sinh thiết xốp khi áp dụng cho mô tươi hoặc mô cố định trong thời gian ngắn.

Lựa chọn cassettes phù hợp

 Chọn cassettes phù hợp với các mẫu đang xử lý . Các mảnh mô co lại trong quá trình xử lý và nếu các lỗ của cassettes quá lớn, các mảnh mô có thể thoát ra hoặc thậm chí có thể chuyển qua mẫu mô khác.

 Phương pháp tiếp cận “một kích thước phù hợp với tất cả” được sử dụng khi đặt mẫu vật vào băng cassette.

Step_17_One-OpenCassette-Specimen_loss_thro_holes_in_cassette
A. Một số mảnh mô nhỏ hơn nhìn thấy ở đây có thể thoát ra ngoài qua các lỗ của cassettes. B. Cassettes có lỗ nhỏ có sẵn cho các mảnh mô nhỏ.

Tránh đặt quá nhiều mô trong Cassettes

 Cassettes chứa vừa lượng mô, do đó cho phép sẵn sàng tiếp cận với thuốc thử xử lý và ngăn ngừa biến dạng mẫu vật. Nếu khối lượng mô quá lớn, sử dụng Cassettes thứ hai.

 Cassette chứa đầy mô, do đó cản trở việc tiếp cận của thuốc thử xử lý. Đôi khi mẫu vật bị biến dạng trong quá trình này.

Step_18_Over-fill_cassette
Cassettes đã quá tải. Nếu quá trình xử lý tiếp tục, các mẫu sẽ bị biến dạng và có khả năng quá trình xử lý sẽ không hoàn chỉnh.

Dán nhãn rõ ràng trên cassettes

 Cassettes luôn được dán nhãn rõ ràng. Việc xác định chính xác các mẫu vật là rất quan trọng.

 Rất khó để đọc nhãn ghi trên cassettes.

Bước_19_Illegible_cassette_labels
Nhãn trên cassettes khó có thể đọc được

Nguồn: https://www.leicabiosystems.com/knowledge-pathway/steps-to-better-grossing/

Minh Khang là nhà nhập khẩu và phân phối trực tiếp các sản phẩm hãng Leica Biosystems.