Việc xác định hàm lượng protein trong thực phẩm là một quy trình thường xuyên để đảm bảo chất lượng và ghi nhãn. Dưới đây là phương pháp đơn giản và nhanh chóng để xác định protein trong các loại hạt, như được mô tả trong tiêu chuẩn AOAC 950.48. Mẫu được phá hủy với axit sulfuric bằng cách sử dụng hệ thống SpeedDigester K-436 hoặc K-439, sau đó được chưng cất và chuẩn độ bằng KjelFlex K-360. Hàm lượng protein xác định được tương ứng với giá trị ghi nhãn.
Giới Thiệu
Việc xác định protein là một trong những phân tích chính được thực hiện trong ngành công nghiệp thực phẩm. Các mẫu cần được phá hủy với axit sulfuric để chuyển đổi nitơ thành amoni sulfat. Sau khi chuyển đổi thành amoniac thông qua quá trình kiềm hóa bằng natri hydroxit, mẫu được chưng cất vào một bình chứa axit boric bằng phương pháp chưng cất hơi nước, sau đó thực hiện chuẩn độ bằng dung dịch axit sulfuric. Hàm lượng nitơ được nhân với một hệ số cụ thể cho từng loại mẫu (5.18 cho hạnh nhân và 5.30 cho các loại hạt cây khác) để tính toán hàm lượng protein.
Thí nghiệm
Thiết Bị
SpeedDigester K-436, K-439, KjelFlex K-360
Mẫu
Hạnh nhân và hạt phỉ, với hàm lượng protein ghi nhãn lần lượt là 22 % và 14 %.
Xác định
Khoảng 0.5 – 0.7 g mẫu (tùy thuộc vào nồng độ protein và thành phần hữu cơ) được cho trực tiếp vào ống mẫu. Thêm 20 ml axit sulfuric và 2 viên Kjeldahl, sau đó thực hiện quá trình tiêu hóa bằng phương pháp “nuts” (K-439) hoặc theo các thông số được chỉ định trong Bảng 1. Sau khi tiêu hóa, amoniac của mẫu được chưng cất vào dung dịch axit boric bằng phương pháp chưng cất hơi nước và chuẩn độ bằng axit sulfuric (Xem Bảng 2).
Phương pháp này đã được xác nhận bằng cách sử dụng 0.18 g tryptophan làm chất tham chiếu.
Bảng 1: Nhiệt độ phá mẫu với K-436, K-439
| K-439 | K-436 | |||
| Các bước | Nhiệt độ [°C] | Thời gian [phút] | Mức | Thời gian [phút] |
| Gia nhiệt lại | 480 | 8.5 | 10 | |
| 1 | 480 | 8.5 | 10 | |
| 2 | 550 | 9.5 | 15 | |
| 3 | 490 | 8.5 | 75 | |
| Làm lạnh | – | 30 | – | 30 |
Bảng 2: Các thông số chưng cất và chuẩn độ với KjelFlex K-360
| KjelFlex K-360 | Metrohm 848 Titrino plus | ||
| Nước | 80ml | Giải pháp chuẩn độ | H2SO4 0.1 mol/l |
| NaOH | 80ml | Endpoint | pH 4.65 |
| Boric acid 4 % | 50ml | Tỷ lệ chuẩn độ | Tối ưu hóa |
| Thời gian phản ứng | 5s | Stop Crit | Drift |
| Năng lượng hơi nước | 100% | Stop Drift | 20 µl/min |
| Thời gian chưng cất | 240s | Thể tích ngưng | 40ml |
| Bắt đầu chuẩn độ | 240s | Thời gian ngưng | Off |
| Loại chuẩn độ | Boric Acid | Tỷ lệ lấp đầy | Max. Ml/min |
| Stirrer Sp. Dist. | 5 | ||
| Stirrer Sp. Titr. | 7 | ||
Kết quả
| Hàm lượng protein K-439 [%] | Hàm lượng protein K-436 [%] | |
| Hạnh nhân | 20.11 (0.20%) | 20.05 (0.20%) |
| Hạt phỉ | 14.10 (0.43%) | 14.14 (0.37%) |
Kết luận
Việc xác định hàm lượng protein trong các loại hạt theo phương pháp Kjeldahl sử dụng các thiết bị SpeedDigester K-436, K-439, và KjelFlex K-360 cung cấp kết quả đáng tin cậy và có thể lặp lại, với các giá trị mong muốn và độ lệch chuẩn tương đối thấp. Thời gian phá mẫu tổng cộng là khoảng 85 phút (K-439) hoặc 100 phút (K-436).
Nguồn: https://www.buchi.com/en/knowledge/applications/nitrogen-and-protein-determination-nuts
Minh Khang là phân phối và nhập khẩu trực tiếp các thiết bị phá mẫu, thiết bị chưng cất hãng BUCHI
EN