Giới thiệu về Máy cắt tiêu bản: Chuẩn bị phần cắt và paraffin
Việc tạo ra các phần paraffin chất lượng bằng máy cắt tiêu bản cần rất nhiều kỹ năng và kinh nghiệm. “Chuẩn bị phần cắt và paraffin” là bước hỗ trợ đào tạo cho những người vận hành chưa có kinh nghiệm. Tất cả các khía cạnh thiết yếu của việc cắt các phần parafin đều được đề cập, bao gồm:
- Sự an toàn
- Thiết lập máy cắt lát tiêu bản
- Dao cắt bệnh phẩm
- Gọt tỉa và gia công thô các khối
- Kỹ thuật cho các phần parafin nhất quán
- Bảo trì máy
- Các lỗi vi phẫu thường gặp
Các bước để cắt + điều nhiệt + khử nước tốt hơn
Từ bệnh nhân đến nhà nghiên cứu bệnh học, việc chuẩn bị mẫu mô để kiểm tra mô học đòi hỏi sự cẩn thận, kỹ năng và quy trình hợp lý. Hướng dẫn này cung cấp lời khuyên thiết thực về các kỹ thuật thực hành tốt nhất và những cách đơn giản để tránh các lỗi phổ biến.
Dưới đây là các mẹo để cắt, điều nhiệt và khử nước từng phần tốt hơn
Sử dụng dao cắt chất lượng cao
Dao cắt sắc cạnh, chất lượng cao luôn được sử dụng để cắt.
Sử dụng một dao cắt quá nhiều lần
Tối ưu hóa góc cắt
Góc cắt luôn được tối ưu hóa cho từng loại máy cắt tiêu bản và dao cắt
Góc cắt không bao giờ được điều chỉnh khi các điều kiện thay đổi (máy cắt tiêu bản khác nhau, loại lưỡi dao mới, loại sáp khác nhau, v.v.).
Cắt khối cẩn thận
Các khối được gọt tỉa cẩn thận, lấy phần mô
Các khối gia công thô sẽ xuất hiện những lỗ nhỏ và mô có thể bị rách
Tránh làm đông lạnh mô
Các khối được làm lạnh trên bề mặt ẩm ướt và luôn lạnh khi cắt
Các khối được đông lạnh trước khi cắt. Điều này đôi khi khiến các khối bị nứt.
Sử dụng khối lạnh
Khối luôn lạnh khi cắt.
Có sự chậm trễ trước khi phần cuối cùng được cắt khỏi khối. Khối có thể ấm và điều này có thể dẫn đến việc các phần bị nén quá mức.
Cắt với tốc độ quay chậm
Các phần cuối cùng của mỗi khối được cắt cẩn thận với tốc độ quay chậm, đồng đều.
Các phần được cắt càng nhanh càng tốt với tốc độ quay nhanh
Sử dụng nước sạch
Nước trong bể điều nhiệt được thay thường xuyên.
Nước trong bể điều nhiệt được bổ sung thường xuyên nhưng chỉ thỉnh thoảng được thay thế.
Đảm bảo các tiêu bản sạch
Luôn kiểm tra độ sạch của tiêu bản trước khi sử dụng. Việc xử lý các tiêu bản được giữ ở mức tối thiểu để tránh nhiễm bẩn các tế bào vảy trước khi tuyển nổi.
Các tiêu bản không được kiểm tra độ sạch. Bụi, sinh vật và các chất gây ô nhiễm khác có thể làm hỏng tiêu bản
Tránh lây nhiễm chéo
Bề mặt nước luôn được tách ra giữa các mẫu để tránh làm ô nhiễm phần này với tế bào từ phần khác.
Mặt nước không bị tách ra giữa mỗi khối. Điều này có thể dẫn đến sự nhiễm bẩn từ mẫu này sang mẫu khác, có thể gây nhầm lẫn và chẩn đoán không chính xác.
Tránh nhiễm bẩn mô
Cẩn thận không chải tóc và cắt móng tay
“Một số nhân viên sản xuất tiêu bản, không cẩn thận dính bẩn vào các mô”
Không điều nhiệt đồng thời từ nhiều khối
Các phần từ nhiều hơn một khối (hộp) không điệt nhiệt đồng thời trong bể
Đôi khi các phần từ hai hoặc nhiều khối (trường hợp) được điều nhiệt đồng thời. Điều này dẫn đến việc xác định mẫu vật không chính xác. Có một rủi ro đặc biệt khi các phần được lấy từ cùng một loại mẫu vật.
Kiểm tra nhiệt độ nước
Nhiệt độ bể điều nhiệt được kiểm tra cẩn thận. Nhiệt độ thấp hơn điểm nóng chảy của sáp là 4–5°C là tối ưu. Các phần phải dễ dàng làm phẳng nhưng sáp không được tan chảy.
Nếu các phần được để trên bể điều nhiệt trong hơn 15 giây, sáp sẽ tan chảy. Mặc dù điều này có vẻ làm cho quá trình diễn ra nhanh hơn nhưng nó có thể nhanh chóng gây ra sự giãn nở quá mức và hỏng mô và tế bào.
Tránh tạo nếp ở các phần
Các phần dễ dàng được làm phẳng trên bể điều nhiệt.
Các phần không bao giờ phẳng hoàn toàn trên bể điều nhiệt. Bể có thể quá lạnh và các phần có thể tạo nếp khi đặt lên tiêu bản
Để vừa đủ các phần trên bể điều nhiệt
Các phần được để trên bể điều nhiệt vừa đủ lâu để làm phẳng sau đó nhanh chóng được đặt lên tiêu bản
Để thuận tiện, một số phần được để trong bể điều nhiệt trong thời gian dài. Điều này có thể gây ra sự giãn nở quá mức và tổn thương mô (đặc biệt đối với các mẫu vật mỏng như mô bạch huyết).
Đừng làm hỏng phần đã điều nhiệt
Cần hết sức cẩn thận để tránh làm hỏng các phần điều nhiệt khi loại bỏ nếp gấp một cách cơ học bằng kẹp.
Các nếp gấp được loại bỏ khỏi các phần điều nhiệt.
Chọn cẩn thận các phần
Không lựa chọn một hoặc hai phần đầu tiên trong dải băng
Phần đầu tiên và thứ hai trong dải băng được chọn để gắn vì chúng trông đẹp hơn các phần sau.
Ngăn chặn tạo bọt các phần
Cần chú ý tránh tạo thành bọt khí trong điều nhiệt. Bất kỳ bọt nào có thể nhìn thấy đều bị bong ra trước khi các phần được đặt trên mặt nước.
Những bọt khí nhỏ trong bể điều nhiệt bị bỏ qua.
Sử dụng thích hợp chất kết dính
Việc sử dụng các miếng dán hoặc chất kết dính (tích điện) như AAS được xem xét và sử dụng một cách thích hợp.
Đôi khi các phần sẽ trôi đi trong quá trình nhuộm (đặc biệt là trong quá trình thu hồi kháng nguyên cho IHC hoặc khi các phương pháp yêu cầu sử dụng nhiệt). Cần mua các tiêu bản hoặc chất kết dính trong những trường hợp này.
Ráo nước trước khi sấy
Các phần được để ráo nước trong thời gian ngắn trước khi đặt vào máy sấy tiêu bản
Các phần không được thoát nước đúng cách trước khi được sấy khô theo chiều ngang. Các phần di chuyển trên tiêu bản và đôi khi không khô phẳng.
Theo dõi nhiệt độ sấy
Nhiệt độ của máy sấy tiêu bản được theo dõi cẩn thận.
Đôi khi máy sấy tiêu bản rất nóng. Nhiệt độ quá cao có thể tạo ra các điểm nóng ở các phần và gây ra vết ố không đều.
Sấy trong thời gian thích hợp
Thời gian sấy tiêu bản tối thiểu và tối đa được theo dõi.
Thời gian sấy tiêu bản thay đổi đáng kể. Việc sấy khô kéo dài ở nhiệt độ cao hơn có thể gây bất lợi cho các mặt cắt.
Minh Khang hiện là nhà phân phối và nhập khẩu trực tiếp các dòng sản phẩm máy cắt tiêu bản hãng Leica Biosystems.
EN